蒋多多: 突变位点注释的又一利器 snpEff-生信修炼手册

蒋多多欢迎关注"生信修炼手册"！
之前的文章中介绍了annovar软件的使用，除了annovar以外，snpEff 也是常用的一款突变位点注释工具。
这款软件基于java语言进行开发，安装过程相对简单，下载之后解压缩即可。本篇对该软件的使用进行一个简介。1. 查询所有可用的数据库列表
命令如下
java -jar snpEff.jar databases > snpEff.databases.list.txt
目前共有42791个数据库，snpEff.databases.list.txt文件内容如下

给出了物种可用的数据库和对应的下载链接。2. 下载数据库
以human为例,首先查看有哪些数据库
grep -i “Homo_sapiens” snpEff.databases.list.txt | cut -f1
GRCh37.75 GRCh38.86 hg19 hg19kghg38 hg38kgtestHg19ChrM
以GRCh38.86数据库为例，下载的命令如下
java -jar snpEff.jar download GRCh38.86
下载成功之后，在软件安装目录的data文件夹下，会有一个以数据库名字命名的文件夹，里面就是下载好的所有文件
GRCh38.86/├── cytoBand.txt.gz├── interactions.bin├── motif.bin├── nextProt.bin├── pwms.bin├── sequence.X.bin├── sequence.Y.bin└── snpEffectPredictor.bin3. 进行注释
命令如下：
java -jar snpEff.jar GRCh38.86 examples/test.chr22.vcf > test.chr22.ann.vcf
GRCh38.86代表数据库的名字，test.chr22.vcf为输入文件，输入文件格式为VCF, 内容如下

输出文件test.chr22.ann.vcf内容如下

可以看到，就是在输入文件的INFO列新增了一个字段信息，字段的名字叫做ANN, 关于ANN中各个部分的详细信息可以参考VCF头部的注释部分。默认情况下会给出以下几种信息，以第一个突变位点为例进行说明1. Allele
突变之后的碱基，第一个突变位点由T碱基突变成了C碱基，对应Allel的值为C2.Annotation
由sequence ontology定义的突变类型，第一个突变位点的downstream_gene_variant在SO系统中的定位如下

如果变异位点属于多个类型时，多个类型之间用&符号连接，比如
intron_variant&nc_transcript_variant3. Annotation_Impact
对变异位点有害程度的简单评估，取值有HIGH, MODERATE, LOW, MODIFIER 4种，含义如下
4. Gene_Name
基因名称5. Gene_ID
基因ID6. Feature_Type
想要分析的特征类型，transcript, motif, miRNA 等7. Feature_ID
根据Feature Type指定的特征，给出对应的ID8. Transcript_BioType
转录本类型, 通常采用Ensembl数据库的转录本类型9. Rank
只有当变异位点位于基因区域时才有值，会给出变异位点所处的exon/intron的编号和该基因的exon/intron的总数，比如一个突变位点位于基因的第3个exon上，该基因一共有12个exon, 对应的Rank的值为3/12当变异位点位于基因区域以外时，该字段的值为空10. HGVS.c
采用HGVS标准命名的基因水平的变异情况11. HGVS.p
采用HGVS标准命名的蛋白质水平的变异情况，只有当突变位点位于编码区是才会有值12. cDNA.pos/cDNA.length
突变位点在cDNA上的位置/cDNA的总长度13. CDS.pos/CDS.length
突变位点在CDS上的位置/CDS的总长度14. AA.pos/AA.length
突变位点在氨基酸序列上的位置/氨基酸序列的总长度15. Distance
变异位点与最近的特征的距离，当变异位点位于基因间区时，会给出与最近的基因之间的距离；当变异位点位于exon区域时，会给出与最近的内含子边界的距离，不同的情况，距离的定义不同。16. ERRORS/WARNINGS/INFO
对注释结果的可靠程度进行评估，各种取值代表的含义如下图

扫描关注微信号，更多精彩内容等着你！